5月16日,齐氏细胞校园行团队应邀走进南京大学(仙林校区)陈院士课题组,就牛蛙成纤维细胞细胞分离、培养作重点交流,这是继中国药科大学(2016年)、南京医科大学(2017年),齐氏生物“原代细胞校园行”小分队三下金陵城,交流、探讨细胞分离技术。
细胞传感器(cell-based sensor)以活体细胞作为分子识别敏感物质基础,转换收集的待测分子信息为声、光、电等信号,藉此检测细胞内外大量和生理反应相关的分析物。细胞生物传感器在环境监测、医学研究、食品工业、发酵工业等方面得到广泛的应用。牛蛙细胞作为载体之一,被众多学者用于细胞传感器研究。
2007年曾有学者建立了基于G蛋白偶联受体重组牛蛙成纤维细胞系(FT细胞)的细胞传感器,通过光学方法测定细胞内钙离子水平或电化学方法测定甲肾上腺素分泌量,以此评价G蛋白偶联受体活性[1]。相较于牛蛙成纤维原代细胞,FT细胞的一个缺点是它们往往与原始的组织有不一样的遗传和表型。相比之下,原代细胞保持了细胞在体内的许多重要标志和功能。虽然牛蛙成纤维原代细胞比FT细胞系更有优势 ,但是获得高纯度的原代细胞是一个非常艰巨的过程。在交流过程中,齐氏“原代细胞校园行”李老师指出,不同于大、小鼠等哺乳动物,牛蛙成纤维原代细胞,生长速度更为缓慢且容易污染,培养过程中血清浓度要提高,同时添加特殊的生长因子,其次, 牛蛙离体组织必须用任氏液湿润,如果滴加时没有把握好时间间隔以及量,会使标本干燥,影响细胞活性。 针对初学者,李老师建议使用PrimacellTM牛蛙成纤维细胞培养试剂盒,以确保实验成功率。
除了牛蛙成纤维细胞,心肌细胞、人脐静脉内皮细胞等都是药物评价细胞传感器的研究载体。研究表明[2-3],使用LAPS–心肌细胞生物传感器可以评价重金属离子长期或者非侵入性方式引发的急性和慢性心脏毒性。另有报道[4-6],以人脐静脉内皮细胞单细胞层附着的三醋酸纤维膜离子选择性电极(ISE)构建的传感器在检测受体活性时比其它方法更灵敏,这在超微量先导物筛选中是非常重要的。
更多:
心肌细胞
详情点击:http://www.chiscientific.cn/product.aspx?id=64205
人脐静脉内皮细胞
详情点击:http://www.chiscientific.cn/product.aspx?id=63985
参考文献:
[1]Feng X.A living cell-based biosensor utilizing G-protein coupled receptors:principles and detection methods[J].Biosens
Bioelectron,2007,22(12):3230-3237.
[2]Curtis T.Development of a mast cell-based biosensor[J].Biosens Bioelectron,2008,23(7):1024-1031.
[3]Liu Q.Detection of heavy metal toxicity using cardiac cell-based biosensor[J].Biosens Bioelectron,2007,22(12):3224-3229.[13]Fritzsche M.A cell-based sensor system for toxicity testing using multiwavelength fluorescence spectroscopy[J].Anal Biochem,
2009,387(2):271-275.
[4]Antczak C.A high-content biosensor-based screen identifies cell-permeable activators and inhibitors of EGFRfunction:
implications in drug discovery[J].J Biomol Screen,2012,17(7):885-899.
[5]May K M.Vascular endothelial growth factor as a biomarker for the early detection of cancer using a whole cell-based biosensor
[J].Anal Bioanal Chem,2005,382(4):1010-1016.
[6]Ghosh G.Measuring permeability with a whole cell-based biosensor as an alternate assay for angiogenesis:comparison with